歡迎訪問杭州越豐
王維洪 羅亞東 俞萬強
杭州捷程生物科技有限公司
豬人工授精技術在國(guó)内始于上世紀五十年代,盛于七十年代,但由于精液儲存設備落後(hòu)、精液保存技術匮乏和外三元母豬發(fā)情診斷難度較大等原因,人工授精的技術優勢一直未能(néng)得到充分體現,進(jìn)而導緻養殖業者對(duì)該技術失去信心。直到本世紀初,在藍耳病等急性傳染病暴發(fā)的背景下,随著(zhe)17℃恒溫保存箱和商品化豬精液保存劑等新型人工授精器材的面(miàn)世,人工授精的成(chéng)功率逐漸得到提高,并在中等規模豬場開(kāi)始興起(qǐ)。報道(dào)測算,2001年,使用人工授精一頭母豬年可節約成(chéng)本在200元以上。鑒于人工授精技術在降低防疫壓力和控制成(chéng)本方面(miàn)的明顯優勢,經(jīng)過(guò)十餘年的日趨成(chéng)熟和蓬勃發(fā)展,到2010年統計,全國(guó)人工授精的普及率已經(jīng)超過(guò)70%,時(shí)至今日,普及率則已達到90%以上。
而在人工授精中,精液質量評定與體外保存是兩(liǎng)個關鍵因素,現就(jiù)這(zhè)兩(liǎng)個方面(miàn)作一探讨。
1 精液質量的評定
1.1 精液質量評定的方法
精液質量評定包括體積、顔色、密度、活力和形态等方面(miàn)。目前有人工評定與CASA(Computer-aided sperm analysis)計算機輔助精子分析評定兩(liǎng)種(zhǒng)方法。
1.1.1 人工評定
人工評定:就(jiù)是人工在顯微鏡下用血球細胞計數器計量精子的數量、活動精子數,以計算精液的密度和活力。
精子密度:最初借肋光學(xué)顯微鏡,將(jiāng)其分爲密、中、稀三個級别進(jìn)行分析,後(hòu)來開(kāi)始用計數闆或密度儀進(jìn)行定量分析,當然這(zhè)就(jiù)克服了主觀性,提高準确性。
活動精子百分率(TM%,The percentage of total motile spermatozoa)指活精子數占總精子數的百分比。目前常用的是在顯微鏡視野下觀察到的運動精子作爲活精子。
精子活力:這(zhè)是評價精子質量比較常用的指标,目前主要以肉眼在顯微鏡視野下觀測做直線運動精子的百分率進(jìn)行判斷,也具有很強的主觀性。且各個國(guó)家制定的标準也不盡相同。
形态檢測:一般分爲畸形率與精子頂體異常率兩(liǎng)個部分。畸形率可在顯微鏡下肉眼根據精子的結構與形态進(jìn)行判定,主觀性大,正常精子中也會(huì)存在一定比例的畸形精子,但一般不會(huì)超過(guò)20%,良好(hǎo)精液中精子畸形率不超過(guò)18%。精子頂體分析則通過(guò)姬姆薩染色法或熒光染色法進(jìn)行,需要掌握一定的染色技術,目前在國(guó)内尚不普及。
1.1.2 計算機輔助精子分析(CASA)
計算機輔助精子分析(CASA):CASA系統快速簡便,可以在很大程度上避免人工評定的主觀性,更可以實現檢測的标準化,目前在國(guó)内大豬場和人工授精站中逐漸被(bèi)采用。目前市場上大多CASA系統,不但可以實現常規檢測,還(hái)可以對(duì)精子運動方式、運動軌迹和運動速率進(jìn)行檢測。但我國(guó)目前還(hái)未出台CASA标準,所以對(duì)衆多CASA的優劣難于作出一個肯定的判斷。
1.1.3 其他方法
近來随著(zhe)技術的發(fā)展和低溫生物學(xué)的不斷深入,精子質量評價的新方法也開(kāi)始出現,主要有精子質膜完整性、精子線粒體活性、精子頂體完整性、精子獲能(néng)檢測、精子DNA完整性的檢測以及受精能(néng)力檢測等方面(miàn),因目前還(hái)處于研究階段,在此不作闡述。
1.2 精液質量的常規值
正常情況下,公豬的射精量在150毫升~250毫升之間。個體差異和品種(zhǒng)差異,個别公豬一次射精的精液總量也可能(néng)達到600毫升。如果一頭公豬平均射精量少于80毫升,就(jiù)應認爲這(zhè)頭公豬的射精量不足。
正常的公豬精液從淺灰白色到濃乳白色。但不正常的精液色澤并不少見。一是精液透明度高,這(zhè)是精液精子密度低的一個明顯表現。透明度高的精液,不必對(duì)精液做進(jìn)一步的處理,直接按不合格精液處理。二是鮮紅色的精液,說(shuō)明精液帶有較多的鮮血。三是綠色或黃色精液,是由于精液中有膿液造成(chéng)的。這(zhè)種(zhǒng)精液并不多見,在一些老齡公豬偶有出現。主要原因是公豬的副性腺炎症造成(chéng)。這(zhè)種(zhǒng)公豬應盡快淘汰,不必進(jìn)行治療。
正常精液精子密度平均2.5億(1億~3億之間),從鏡檢看精子密度高的精液往往呈雲霧狀。正常精液的pH值在7.2~7.8之間。
能(néng)夠前進(jìn)運動的精子叫(jiào)有效精子,唯有有效精子才有與卵子結合受精的可能(néng)性。精子的活力是指有效精子占總精子數的百分率,是鑒定精液品質比較主要的指标之一。一般用目測視野中呈直線前進(jìn)運動的精子數占觀察精子總數的百分比表示,采用0~1.0十級評分,分爲10個等級。若視野中全部精子都(dōu)作直線前進(jìn)運動,評爲1.0分;有90%的精子作直線前進(jìn)運動,評爲0.9分,其餘類推。不過(guò)也有采用五級分制的評分方法。爲保證較高的受精率,新鮮精液精子活力一般爲0.7~0.8,液态保存精液活力一般在0.6以上,冷凍保存精液活力在0.3以上,方可用于輸精。
1.3 影響精液質量的因素
影響精液質量的因素有很多,歸納起(qǐ)來有以下幾個:品種(zhǒng)因素、年齡因素、營養因素、環境因素、疾病因素以及采精頻率等。
1.3.1 品種(zhǒng)因素
正常而言采精量由多到少依次爲大約克、長(cháng)白和杜洛克。如長(cháng)白豬正常采精量在250ml,杜洛克的正常采精量則在200ml左右。
1.3.2 年齡因素
一般而言,從性成(chéng)熟到壯年,精液量和精子密度逐年增加,進(jìn)入老年期就(jiù)開(kāi)始下降。以大約克爲例,其在9月齡時(shí)采精量開(kāi)始增加,精子密度也達到了1.75億/ml,到5歲後(hòu),其精子密度則下降到1.5億/ml以下。
1.3.3 營養因素
包括能(néng)量、蛋白、微量元素、維生素和激素水平。其中體重指标是一個重要的參考因子,控制體重,防止過(guò)胖是日常飼養管理的一個要點,用料量與體重的關系見下表。
表1 用料量與體重的關系
體重(kg) | 總采食量(kg) | 維持需要用料(kg) | 射精與生精用料比(%) | 維持用料比(%) |
60 | 1.75 | 0.7 | 3 | 40 |
90 | 2.5 | 1.1 | 3.2 | 44 |
120 | 2.9 | 1.35 | 3.4 | 47 |
200 | 3 | 3.8 | 75 | |
300 | 3.9 | 4.6 | 90 |
據研究,提高日采食消化能(néng)到38.66MJ時(shí),雖提高了采精量和精子總數,但降低了精子密度,并增加了精子畸形率,且這(zhè)一下降在統計學(xué)上是顯著的。而當蛋白質提高到19%時(shí),可提高血液中激素水平,從而提高公豬的性欲。在公豬日糧中添加一定量的維生素A和維生素E則可提高精子數和活力。另外,在公豬日糧中應防止微量元素鋅的缺乏,并可适當添加一定量的微量元素硒。
1.3.4 環境因素
主要考慮季節、溫度和環境衛生幾個方面(miàn)。分季節而言,春季精液質量比較好(hǎo),夏季比較差。公豬比較适宜的環境溫度爲18℃~20℃。從實踐中得出,在夏季肌注250mg睾酮可顯著減少高溫對(duì)畸形率的影響。
1.3.5 疾病因素
一些疾病(如藍耳病、僞狂犬等)會(huì)對(duì)精液質量産生嚴重的影響,因而需做好(hǎo)這(zhè)些疾病的免疫工作。
1.3.6 采精頻率
采精頻率過(guò)高不僅會(huì)造成(chéng)采精量的減少,而且還(hái)會(huì)增加畸形精子的數量和比例。一般來說(shuō),對(duì)于年輕公豬和年老(5歲及以上)公豬,以一周一次爲宜;對(duì)2歲~4歲的公豬則以3~5天一次爲宜。
|